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酶联免疫吸附测定试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠钙卫蛋白(CALP)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠钙卫蛋白(CALP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
【标本收集注意事项】
收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。
血清和血浆避免使用溶血，高血脂标本。
标本应清澈透明，悬浮物应离心去除。
标本收集后若不及时检测，需按一次使用量分装，冻存于-20℃，-80℃电冰箱内，避免反复冻融。
可根据标本的实际情况，做适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数)。
收集标本，尽量做到双份的用量，避免一次实验失败，重复实验时标本缺失，从而耽误实验进程。
收集标本时，应该做好防护措施（比如戴手套，口罩，护目镜等），认为所有标本都具有一定的潜在危险性。
样本处理应该在生物安全柜里面，并且正确使用生物安全柜。
【注意事项】
酶联免疫吸附测定试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品，其他成分不可冻结。
浓缩酶结合物体积小，运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000rpm离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，使结晶*溶解后再配制洗涤液。
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